Protocol:Liposomal Clodronate-mediated Macrophage Depletion in the Zebrafish Model

氯膦酸盐脂质体Clodronate Liposomes与荧光标记的葡聚糖共同注射,以使能够验证精确和准确的注射,并跟踪氯膦酸盐脂质体对整个幼虫中巨噬细胞的影响。为此,在氯膦酸盐脂质体与荧光标记的葡聚糖静脉内共注射后,我们目视验证了这些物质成功注射到循环中,并监测了巨噬细胞对荧光葡聚糖的摄取及其随时间推移的最终死亡。
2023年08月20日  |  清除方案

氯膦酸二钠脂质体(Clodronate Liposomes)

Clodronate本身不是一种有毒药物,脂质体(如果制备的成分是磷脂酰胆碱和胆固醇)也没有毒性。游离氯膦酸盐不易通过脂质体和细胞膜的磷脂双层,但脂质体易被巨噬细胞吞噬。这意味着氯膦酸盐一旦使用脂质体作为载体递送到吞噬细胞中,就不会从细胞中逃逸出来。在巨噬细胞中溶酶体磷脂酶影响下脂质体的双层结构破坏,溶解在脂质体双层之间的水性区室中的药物被释放到细胞中。氯膦酸盐在细胞内积累,并且在超过阈值浓度后,细胞被不可逆地损伤并通过细胞凋亡而死亡(J.Immunol.Meth.193:…
2023年08月05日  |  机制原理

脂质体(Liposome)

脂质体的结构,于1965被英国剑桥Alec D. Bangham发现。Alec D. Bangham被誉为脂质体之父。晚年时期,他在著名生物学杂志FASEB的 Milestones系列(2005年)和Essay系列(2009)发表过论文。Alec D. Bangham于2010年3月9日在家中安静离世,享年88岁。国外多家媒体报道了该消息,加州大学生物分子工程科学家 撰写了讣告,并发表在著名生物学杂志FASEB J. Alec D. Bangham发现当两性分子如磷脂分散于水相时,分子的疏水尾部倾向于聚集在一起,避开水相,而亲水头部暴露在水相,形成具有同圆…
2023年08月05日  |  机制原理

氯膦酸二钠(Clodronate)

分子式:CH2Cl2O6P2Na2分子量:288.86 CAS:22560-50-5溶解性:Clodronate易溶于水(72mg/ml),微溶于甲醇,不溶于乙醇和DMSO氯膦酸二钠(Clodronate),化学名为:二氯亚甲基二膦酸二钠,是双膦酸盐家族的成员。氯膦酸二钠为第一代双膦酸盐药,临床上作为一线主要用于治疗恶性肿瘤并发的高钙血症;溶骨性癌转移引起的骨痛;可避免或延迟恶性肿瘤溶骨性骨转移;各种类型骨质疏松。其有口服的胶囊和静脉滴注用的注射液。氯膦酸二钠是骨代谢调节剂,其能进入…
2023年08月05日  |  机制原理

巨噬细胞清除的“特洛伊木马”策略(Trojan Horse strategy)

氯膦酸二钠(Clodronate)作为治疗溶骨性疾病的药物主要成分,本身无毒。静脉给予游离氯膦酸二钠后,开始的半衰期为2小时,随后半衰期逐渐缩短,在48小时内80%药物以原形随尿排出。同时,游离氯膦酸盐也不易通过细胞膜的磷脂双层而直接进入细胞内。
2023年07月25日  |  机制原理

眼球后静脉注射(Retro-Orbital Injection, ROI)

将小鼠的头靠近针头。将拇指和食指放在眼球的两侧,牢固地握住眼部区域。使用向下的动作,尽可能暴露眼球,同时保持眼球处于静止位置(这需要将拇指和食指紧邻眼球放置,但不要再向下)。将针头从眼睛的前端插入眼球下方的区域(可选:可以注射其针头完全插进去,直到针头感觉到眶后丛后面的骨头并稍微回撤点针头)。将液体注入小鼠。迅速拔出针头,用眼睑轻轻遮住眼睛,防止出血。监测小鼠是否有任何出血或其他不适的迹象,这些迹象一般不会发生。操作步骤详解:1.吸入麻醉小鼠2.根据…
2023年08月13日  |  给药方式

尾静脉注射(Tail Vein Intravenous Injection, IV, i.v.)

静脉内给药是给药氯膦酸盐脂质体(Clodronate Liposomes)最常用的方法,迄今为止发表的所有氯膦酸盐脂质体研究中约有一半使用静脉给药途径。尽管如此,但仍需要考虑许多因素以确保清除提供所需的结果正确性。吞噬细胞耗竭应始终在感兴趣的组织中进行验证,并且结果不能从一个物种外推到另一个物种。即使在相同品系的小鼠中,基因敲除或其他转基因动物也可能具有可能改变它们对氯膦酸盐脂质体反应的特征。因此,通过彻底了解氯膦酸脂质体在静脉注射后的预期行为来仔细考虑其作用,必须…
2023年08月13日  |  给药方式
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